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在生物化学中elisa是什么意思

在生物化学中elisa是什么意思

楼主你好!

ELISA法指的是酶联免疫吸附实验 ,即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术,可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,它的基本原理主要是:

采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂); ②酶标记的抗原或抗体(标记物);③酶作用的底物(显色剂)。

测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。

希望可以对你有所帮助!

免疫组化实验和elisa实验有什么区别?

两者都是基于抗原与抗体之间能发生特异性结合这一基本原理。

免疫组化是对组织标本或细胞标本中的抗原类物质如细胞中的病原体、蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、酶、激素、核酸等进行定位或定量检测,检测材料是石蜡切片或细胞涂片,检测时用到的抗体可以用酶标记,也可以用荧光素标记。

酶联免疫吸附试验既可以检测抗原也可以检测抗体,若检测抗体,则酶标板需要用抗原包被;若检测抗原,则酶标板需要用抗体包被。

ELISA里一抗和二抗的区别

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑:

【一抗的种属来源】

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。

【一抗的类别亚型】

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG。艾美捷能为您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特异性只结合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha-Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。

【二抗的种属来源】

一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里, 如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。 艾美捷有相应的驴来源的二抗,非常适合做类似双标的免疫实验。

【二抗的耦联标记】

一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测系统。在一些荧光检测方案中,则需要选择不同的荧光标记;而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。艾美捷能为您提供上述所有不同类型标记的二抗。

【是否经过血清吸附过的二抗】

为减少二抗与样本的非特异性结合,艾美捷还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那我们向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗,这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织(如IgG等)可能发生非特异性反应的IgG,因此将非特异性结合降低到最低。

【Anti-IgG还是Anti-IgG, F(ab’)2 fragment】

在一些如胸腺、脾脏、血液的组织以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等细胞内,通常含有较多的Fc受体,这时候选择二抗时最好选择Anti-IgG, F(ab’)2 fragment这样的特异性二抗,这样就消除了由于Fc部分与IgG的非特异性结合。常规的Anti-IgG (H+L)二抗与IgG的重链和轻链都有结合反应,即与IgG的Fc的F(ab’)2片段都能结合;由于IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此Anti-IgG (H+L)与它们都有交叉反应。而Anti-IgG, F(ab’)2 fragment经过了IgG Fc片段的吸附,因此只与IgG的F(ab’)2片段结合,然而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此与它们也有交叉反应。

【Anti-IgG(H+L)、Anti-IgG (gamma)、Anti-IgM (mu)、Anti-IgA (alpha)】

在一些特殊的实验里,只需要检测样本里的IgG或者IgM,常规的Anti-IgG (H+L)由于与IgG的重链和轻链都有结合反应,而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此不能特异性的检测某种类型的IgG或者IgM。这时候就需要针对特殊类型Ig分子的二抗。艾美捷备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。

什么是ELISA?

Elisa技术(enzyme-linked immuno sorbent assay酶联免疫吸附测定)

ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。

试剂盒检测原理

ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV(Hepatitis E virus戊型肝炎病毒)多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。

elisa是免疫组织化学技术吗

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

elisa(酶联免疫吸附试验)

用到了免疫学原理和化学反应显色,待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液,因而没有用到组织包埋、切片等技术,这是与免疫组化的主要区别,操作上 开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面,从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上,这就是“吸附”的含义。

免疫组化和elisa所用到的原理 大致相同,只是因为所检测的样品不同,从而在操作方法上有所不同。Elisa多用于定量分析,其灵敏度非常高。

放射性免疫分析与elisa有什么区别

主要是标记物不同(放射性物质/酶),其他的差不太多

梅毒螺旋体抗体.ELISA.是什么意思

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梅毒螺旋体抗体:是梅毒螺旋体侵入人体后,在血清中可出现特异性抗体,是梅毒感染和监测的主要标志。

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ELISA:酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。

免疫印迹与elisa和western blot有什么区别,似乎原理差别不大,谁能细致说说

酶联免疫吸附实验(ELISA) ,蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot

都是抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。

原理都是靠免疫学的抗原抗体结合,二抗上带酶,通过与底色反应显色。区别的话WB所检测的一般是抗原,而Elisa抗原抗体都可以检测。WB只能用抗体去检测你的蛋白样品。ELISA可以固定抗原也可以固定抗体。WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚体、降解产物等,一句话,WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的;而Elisa无能为力,一锅端了。

二点酶免疫法是不是就是elisa

二点酶免疫法我不清楚这个名称 但是

酶联免疫法一定就是elisa啦 因为酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA)所以elisa是简称也是一般大家都这么叫

检测标准中oieelisa wp ss是什么意思

检测自身抗体的方法有多种,包括间接免疫荧光法、颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验、放射免疫法、免疫双扩散法、参比对流免疫电泳法、免疫印迹法、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法以及速率免疫比浊法等,间接免疫荧光法即适用于检测针对原位成分也适用于可溶性成分的抗体,其余各法均适用于针对可溶性成分的抗体,可根据临床需要及医院条件去选用。以下介绍常用的几种。(1)间接免疫荧光法(IIF)这是进行抗核抗体、抗核仁抗体和抗胞浆抗体筛选检测的最有效方法。在些检测系统中,以组织培养细胞和器官的冷冻片切为反应底物。(2)免疫双扩散法(ID)免疫双扩散法过去称为“Ouchterlony试验”是最早用于鉴定系统性自身免疫性疾病中自身抗体特异性的检测系统。在这些系统中,琼脂凝胶是血清中抗体扩散从相反方向扩散过来的抗原相遇的介质,在抗原与抗体间形成沉淀线。鉴定抗原抗体系统时需标准参照血清。当二者相同时,两条沉淀线在琼脂凝胶上形成一条连续的沉淀线。免疫扩散中形成的沉淀线可用来鉴定如抗Sm、RNP、SS-B抗体系统及许多前述的可沉淀性抗原抗体系统。

在生物化学中elisa是什么意思:等您坐沙发呢!

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